熒光定量Q-PCR檢測為何會如此受歡迎,要從兩個問題入手,個熒光定量Q-PCR是什么?熒光定量Q-PCR檢測作用是什么?弄清楚這兩個問題,就知道了!
首先我們來分析個問題——什么是熒光定量Q-PCR?,從概念上講,熒光定量PCR全英文名為Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction,Q-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標(biāo)準曲線對反應(yīng)體系中未知模板進行量化分析的方法。
因為這個方法有三個優(yōu)勢,分別是屬性強、靈敏度高、準確度高,所以應(yīng)用甚廣,但凡事都是兩面的,在熒光定量PCR應(yīng)用過程中,讓人棘手頭疼的問題便是污染,污染輕則導(dǎo)致實驗失敗,重則癱瘓整個實驗室,可以說污染得以控制熒光定量PCR實驗便成功了一半。
常見的污染形式是:熒光定量PCR反應(yīng)體系經(jīng)過不斷升降溫,液體蒸發(fā)又冷凝,PCR管內(nèi)很容易形成攜帶有大量DNA擴增片段的氣溶膠,氣溶膠容易泄露擴散(如打開擴增管蓋、擴增管破裂等)而污染實驗室
所以由此可見,熒光定量Q-PCR檢測存在的必要,也就是熒光定量Q-PCR檢測的作用,就是為了試驗安全,試驗者的人生安全。
熒光定量Q-PCR檢測可以實現(xiàn)對污染的監(jiān)控,比如可以檢測實驗分區(qū)是否存在氣溶膠污染,監(jiān)控方法為將去離子水放置實驗區(qū)域2-3h后,將該去離子水作為模板擴增,去離子水可在實驗室多點放置。
熒光定量Q-PCR檢測是可以知道儀器(如離心機、移液槍把手等)表面是否被污染,用無菌棉簽蘸取去離子水擦拭儀器及試驗臺表面,取少量液體做為模板進行擴增。
同時還能檢測移液槍是否被污染,用移液槍反復(fù)吹打無污染的去離子水,將該去離子水作為模板擴增。以及試劑是否被污染,將試劑做為陰性模板進行擴增。
看完以上講解,您是不是對熒光定量Q-PCR檢測為何廣受市場歡迎有一定的了解了呢,如果您需要了解更多熒光定量Q-PCR檢測等相關(guān)信息,歡迎咨詢毓秀生物科技(上海)有限公司!