更新時(shí)間:2024-09-26
伊紅染液是一種酸性生物染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。為1%的水溶液。
伊紅染液是一種酸性生物染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。為1%的水溶液。
伊紅染液使用說明:
1. 樣品處理
a) 對(duì)于石蠟切片:
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。
換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘。
無(wú)水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
蒸餾水2分鐘。
b) 對(duì)于冰凍切片:
蒸餾水2分鐘。
c) 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:
用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。
蒸餾水洗滌2分鐘。
換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。
2. 伊紅染色
對(duì)于上述處理好的樣品:
伊紅染色液染色染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。
此時(shí),如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。
注:如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染,可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行伊紅染色。
3. 脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色
a) 脫水、透明、封片:
95%乙醇脫水2分鐘。
換用新鮮的95%乙醇再脫水2分鐘。
二甲苯透明5分鐘。
換用新鮮的二甲苯,再透明5分鐘。
用中性樹膠或其它封片劑封片。
顯微鏡下觀察,細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
b) 進(jìn)行其它染色:
如果進(jìn)行免疫熒光染色,或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色,在伊紅染色液染色后:
70%乙醇洗滌2次,每次2分鐘。
PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。
然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。
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